Cys 측쇄 tBu 보호 그룹 방법 제거
Cys(tBu)일반적으로 TFA와 I2는 상대적으로 안정적이므로 이전 이황화 결합 쌍을 방해하지 않고 세 번째 이황화 결합 쌍 이상의 펩타이드를 생성하기 위해 결합하는 데 자주 사용됩니다.
tBu 제거 방법에는 일반적으로 수은 아세테이트 및 트리클로로메틸실란/디페닐 설폭사이드 방법이 포함됩니다.
다음은 아세트산수은법의 단계를 소개합니다.
- 얼음 TFA 중간에 용해된 tBu의 펩티드를 가져올 것입니다(5-10mg/ml)
- 아세트산 수은 당량의 10배를 첨가하고 3시간 동안 교반한다.
- 감압하에 회전시켜 과잉 TFA를 증발시키고, 10% 아세트산 수용액에 녹인다.
- 메르캅토에탄올 20배 상당량을 첨가하고 5시간 동안 방치합니다.
- 침전물을 제거하기 위해 원심분리한 후 탈염 또는 HPLC 정제를 수행합니다.