고상-수지에서 펩타이드를 절단하는 두 가지 방법

고체상 Fmoc 펩타이드를 화학적으로 합성한 후 절단하는 방법에는 여러 가지가 있습니다. 이제 누구나 공통적으로 사용하는 두 가지 기본 유형을 소개하겠습니다.

건조된 수지를 셰이커 플라스크에 넣고 적절한 양의 청소제(Scavengers) 절단 시약 트리플루오로아세트산(TFA), 10-25ml/g 수지를 추가하고 뚜껑을 덮고 실온에서 간헐적으로 흔듭니다. 새로운 TFA로 레진을 여과합니다. 레진을 2~3회 세척하고 여액을 합한 후 빙하 에테르의 8~10배 부피를 적가합니다. 때때로 그것의 일부는 TFA에서 증기로 제거될 수 있습니다. 조 펩타이드 침전물이 얻어졌습니다. 디에틸 에테르는 얼음으로 냉각되어 침전 효율을 향상시킬 수 있습니다. 마지막으로 침전된 원유 펩타이드를 수집합니다.

적용 가능한 수지:킹 수지 또는 링크 아미드 수지

1% TFA:

1g 폴리펩타이드-매달린 수지를 1% TFA를 함유한 용액에 첨가했습니다. 디클로로메탄 용액 유리 진탕 플라스크를 밀봉하고 2분간 진탕했습니다. 질소를 사용하여 10% 피리딘이 들어 있는 또 다른 새로운 메탄올 진탕 플라스크에 여액을 붓습니다. 위의 작업을 10회 반복합니다. 30ml DCM, 30ml MeOH를 사용합니다. 레진에 남아 있는 보호된 펩타이드를 순차적으로 3회 세척합니다. TLC 또는 HPLC로 세척 잔여물을 확인하세요. 모든 여액을 합치고 감압 하에서 용매를 증발시켜 5% 부피를 남깁니다. 물 40ml를 첨가하고 혼합물을 얼음{16}으로 냉각하여 침전을 돕습니다. 여과 후 깨끗한 물로 3회 세척한 후 진공건조함에 넣어 사용하세요. KOH 또는 P2O5 건조시키십시오.

묽은 아세트산:

AcOH/TFE/DCM(2:2:6)을 사용합니다. 레진에 매달린 펩타이드를 커팅 용액으로 2시간 동안 처리한 후, 레진을 여과하고, 레진을 커팅 용액으로 3회 세척합니다. 혼합여액에 15배 부피의 n-헥산을 첨가하고 회전증발하여 과잉의 아세트산을 제거한다. 펩타이드 회수 방법은 아래에 자세히 설명되어 있습니다.

적용 가능한 수지:2- CTC 수지